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技術(shù)服務(wù)
technical service桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞蛋白表達(dá)
服務(wù)介紹
昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng) (baculovirus expression vector system, BEVS) 是以昆蟲(chóng)桿狀病毒作為外源基因載體,昆蟲(chóng)和昆蟲(chóng)細(xì)胞作為受體的表達(dá)系統(tǒng)。該系統(tǒng)具有安全性好、重組蛋白表達(dá)量高、重組蛋白翻譯后修飾完整、易實(shí)現(xiàn)大規(guī)模低成本生產(chǎn)等特點(diǎn),因而得到了廣泛的應(yīng)用。
桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞系統(tǒng)蛋白表達(dá)服務(wù)具有以下優(yōu)勢(shì):
1. 高表達(dá)水平:桿狀病毒昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)高水平的蛋白質(zhì)表達(dá),以滿(mǎn)足大規(guī)模蛋白質(zhì)制備的需求。
2. 翻譯后修飾:昆蟲(chóng)細(xì)胞具有類(lèi)似哺乳動(dòng)物細(xì)胞的蛋白質(zhì)修飾系統(tǒng),能夠進(jìn)行正確的糖基化、磷酸化等修飾過(guò)程,從而保證蛋白質(zhì)的功能和穩(wěn)定性。這使得該系統(tǒng)適用于表達(dá)一些可能對(duì)哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞產(chǎn)生負(fù)作用的蛋白,如激酶以及毒性蛋白等。
3. 較低的宿主蛋白污染:桿狀病毒昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)在昆蟲(chóng)細(xì)胞內(nèi)的高效表達(dá),減少宿主蛋白污染,有利于蛋白質(zhì)的純化和功能研究。
4. 經(jīng)濟(jì)性:昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)相對(duì)廉價(jià),使得桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞系統(tǒng)在蛋白質(zhì)表達(dá)方面具有經(jīng)濟(jì)效益。
5. 易于放大培養(yǎng):桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞系統(tǒng)易于放大培養(yǎng),能夠在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的蛋白質(zhì)生產(chǎn)。
遠(yuǎn)泰生物在桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞蛋白表達(dá)方面具有豐富的經(jīng)驗(yàn),利用Bac to Bac技術(shù)快速地產(chǎn)生重組病毒,并可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞從小規(guī)模培養(yǎng)到大規(guī)模發(fā)酵的過(guò)程。可提供全方位、一站式的重組蛋白表達(dá)服務(wù),包括基因設(shè)計(jì)、優(yōu)化及合成,蛋白表達(dá)條件優(yōu)化,蛋白純化及后續(xù)加工(標(biāo)簽切除,內(nèi)毒素去除及鑒定,生物素標(biāo)記等)。
服務(wù)流程
服務(wù)內(nèi)容
項(xiàng)目名稱(chēng) | 項(xiàng)目?jī)?nèi)容 | 服務(wù)周期 |
Bacmid制備 | 基因優(yōu)化及合成 亞克隆至表達(dá)載體pFasbac1 制備重組的Bacmid | 4-5周 |
P1代病毒制備 | P1代Baculovirus 制備 P1代轉(zhuǎn)染 | 1-2周 |
P2代病毒制備 | P2代Baculovirus 制備 P2代感染W(wǎng)B鑒定 | 1-2周 |
小樣純化 | Ni柱親和純化 純度檢測(cè) | 1-2周 |
放大培養(yǎng)及蛋白純化 | N放大培養(yǎng)500ml(或根據(jù)客戶(hù)需求量) Ni柱親和純化 純化蛋白檢測(cè) 蛋白分裝發(fā)貨 | 3-4周 |
最終交付(500ml培養(yǎng)體積)
2ug Bacmid質(zhì)粒,P2代病毒,重組蛋白(根據(jù)實(shí)際產(chǎn)量)及蛋白報(bào)告。按步驟收費(fèi),不成功不收費(fèi)。

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